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思思的身体恢复很好,经过评估后,杨平觉得可以使用没有阉割的病毒进行实验,虽然有一定的风险,但是他决定一试。
如果总是原地踏步,不感冒风险,很难取得一些突破,在做好充分评估与准备的情况下冒险是可行的。
即使不成功,就当作一次严重的感冒,杨平积极准备继续的实验。
南都医大的实验室开始对K病毒进行新一轮的各种测试,新的K病毒经过多种反复检验,被认为没有脱离源病毒的基本特性,使用可以复制的病毒进行实验的安全性能够得到保证。
三博医院这边的肿瘤实验室通过一系列的检查也得出结论,K病毒目前大部分感染肿瘤细胞,少部分感染正常细胞,但是从几次实验的观察来看,它只会引起肿瘤细胞的凋亡,不会引起正常细胞的凋亡。它对正常细胞的影响低于它的源病毒---腺病毒对人体细胞的影响。
K病毒使用的载体源病毒是一种腺病毒---但是不普通的腺病毒,而是经过重组的腺病毒。重组腺病毒,这种存在复制缺陷的腺病毒载体系统,在基因治疗、基础生命科学研究等领域被广泛应用。
重组腺病毒具有以下几个显着的优点:感染范围广,几乎可以感染所有的细胞系、原代细胞和部分组织;感染效率高达100%,全面超越其他病毒载体工具和脂质体转染;对外源基因容载能力大,容载能力可以高达8Kb;不整合基因组;滴度高,操作方便。因此,重组腺病毒一直被认为最具有潜力的基因递送工具。
当然,杨平借用它不是为了让它递送基因,而是让它递送K因子,在使用它之前,杨平对它进行了进一步的改良。然后将K因子植入到它的蛋白质结构里,组成一个蛋白质复合体。
目前常用的腺病毒载体是基于人腺病毒5型,其基因组是36Kb长的线性双链DNA,这种腺病毒是通过自身的纤维和细胞表面的受体(如CAR)结合被内吞进入细胞,然后从内吞体(endosome)转移到细胞质和细胞核内,借助细胞的转录和翻译机器启动病毒的复制组装,一个完整的病毒生活周期会引发细胞死亡从而释放出病毒粒子。
普通的腺病毒也不是什么善茬,这种病毒一旦感染,容易引起呼吸道、消化道、泌尿系等部位的疾病,如咽炎、肺炎、结膜炎等等,引起发热、咳嗽咳痰、咽部红肿充血、腹泻、呕吐等症状,严重的还会引起呼吸困难窒息死亡。
但是重组腺病毒与普通腺病毒完全不一样,它们之间的区别类似于狗与狼,重组腺病毒已经完全被科研员驯服,它不仅被敲掉了复制基因,而且还在掌握它的基因与特性的基础上,将它的一些致病性基因也敲掉了,所以,经过重组后的这种病毒已经没有很强的致病性,但是保留了一些其它对实验有用的特性,比如:感染范围广,感染效率高,而且经过杨平的改造,它对分化不全的肿瘤细胞感染非常高,对正常细胞的感染率反而不及普通病毒。
所以经过杨平精心重组后的腺病毒潜力非常大,它本身就是一个重大创新,不仅仅可以用在K病毒疗法中,以后很多针对肿瘤的治疗中都可以用到,它等于在治疗的肿瘤的武器库里增添了一种高能量高精准度的武器。
尽管如此,杨平也不敢掉以轻心,他还是把这些病毒的基因进行了细致的复检,确认他们的基因组没有问题。
这种重组后的特殊腺病毒,比起原来的普通腺病毒,还有一个巨大的优势。
原来的普通腺病毒,具备较强的传染性,因为它在56℃的环境下能够存活30分钟,在100℃的环境下也能够存活两分钟,这给它的传染性提供了条件。
而经过杨平团队重组后的腺病毒,它在干燥的环境下存活不超过一分钟,平均存活时间是短短的二十多秒。即使在湿润的环境中,56℃的温度存活时间也不超过一分钟。所以这种病毒极为脆弱,它不具备在离体的环境中存活,它只能存在人体内部,而且人体免疫系统对它保持了足够的杀伤力,这让它对人体的威胁远远低于普通的腺病毒。
所以所以无论从哪方面来看,这种重组后的腺病毒是非常安全的,所以杨平的冒险不是随便乱来,他有足够的把握才会做这事。
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南都医大病毒学实验室培养出来的k病毒已经完成封装,一样采用冷链运输送到三博医院,杨平把这些病毒注射到思思的体内。
明显活病毒比阉割的病毒对人体的影响要大很多,在病毒注入的第3天,思思又引起了高烧,不过这次的体温没有那么夸张,只是39度,对于已经经历过多次42度高烧考验的思思,他完全可以扛住39度的高烧。
这次发热持续的时间比以前更长,但是幸运的是,它一直在39.0度上下波动,最高的时候也没有突破40度,最低的时候大约是38.5度。它的热型呈波浪形,这很符合K病毒在体内与免疫系统斗争的情形,因为现在的K病毒跟之前的k病毒完全不同。之前的k病毒是敲掉复制基因,它是一种阉割病毒,在免疫系统的攻击下,它的数量只会不断地减少,所以高烧一旦过了巅峰,后面只能一直走下坡路。
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现在的k病毒它具备复制能力,当人体的免疫系统杀死一部分病毒之后,它又会通过复制恢复病毒数量,这样病毒与人体免疫系统呈现拉锯战,这种拉锯战在热型的表现上就是呈现波浪形。
通过穿刺送检的肿瘤活体组织标本果然符合杨平的推测,跟前几次试验明显不同,这次实验病毒感染肿瘤细胞的比率非常大,从穿刺取得肿瘤细胞标本观察,居然超过10%的肿瘤细胞被感染,而且这个比率随着病毒的复制还在上升,几个不同部位穿刺取出的标本带有极大的均衡性。
颅内的肿瘤鉴于它的危险性,无法进行穿刺取标本,但是从其它部位的肿瘤组织标本感染比率来推测,颅内肿瘤被病毒感染的可能性几乎差不多,因为经过修改后的这种病毒,它能够穿透血脑屏障。
就是这个结果让杨平十分兴奋,说明K病毒经过人体免疫系统的打击后,一部分成功到达肿瘤细胞,到达目的地之后,K病毒开始利用肿瘤的营养进行复制。
没想到一次谨慎地冒险,收获这么大,看来四平八稳有时候不一定是好事,创新必须要有冒险精神。
随着继续的观察,这些被感染的肿瘤细胞,现在开始大面积开始凋亡,从计算的比率来看,差不多超过3%的肿瘤出现死亡,感染率和凋亡的比例跟之前一样,保持了三比一的比例。因为因为感染率的提升,直接导致凋亡率也跟着提升。
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